《中国典型病例大全》目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对大鼠缺血性脑卒中的疗效和作用机制。方法采用全骨髓贴壁法分离BMSCs,用流式细胞术鉴定BMSCs;制备大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠模型,随机分为假手术组、MCAO组和BMSC组;对各组大鼠进行mNSS评分和TTC染色,并采用免疫组织化学法、免疫荧光法和免疫印迹法检测各组脑组织梗死区及其周围关于Caspase-3、MAP-2、GAP-43及GFAP的阳性表达水平。结果 BMSCs低表达CD45,高表达CD90、CD29;大鼠在移植BMSCs后第3、7和14天的mNSS评分和梗死体积百分比均降低,其梗死区的Caspase-3下降,MAP-2、GFAP和GAP-43表达增强。结论 BMSCs移植能够促进MCAO模型大鼠的神经功能恢复和减小脑梗死体积,可能是通过抑制细胞凋亡、轴突再生、神经再生细胞增殖等机制发挥其疗效。
目的探讨大鼠Sesn2/AMPK信号介导肝脏的自噬在间歇低氧和复氧致糖代谢异常中的作用。方法 48只大鼠随机分为对照组(NC)与慢性间歇低氧(CIH)组,每组24只,CIH组置于间歇低氧舱8 h/d,持续8周,随后予常氧饲养4周;NC组始终常氧饲养。两组大鼠分别在基线、间歇低氧8周、复氧4周时检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、肝脏Sesn2、AMPK、p-AMPK蛋白及mTOR、LC3 mRNA水平。结果基线时,两组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);间歇低氧8周时,与NC组比较,CIH组FBG、FINS、HOMA-IR、mTOR水平增高,Sesn2、p-AMPK/AMPK、LC3水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);复氧4周后,两组上述指标差异无统计学意义(P> 0.05)。结论慢性间歇低氧可以导致大鼠FBG、FINS增高,可能是通过抑制Sesn2/AMPK介导肝脏的自噬引起胰岛素抵抗。目的基于TCGA数据库探讨Bcl-2结合抗凋亡基因(BAGs)家族在多种肿瘤中的功能作用。方法从TCGA中下载11 057个肿瘤样本,由此对BAGs家族(BAG1～6)进行多维分析。结果 BAGs家族在肿瘤和正常组织中的表达存在差异,并且不同BAG基因的表达对不同癌症的生存预后的影响差异有统计学意义。结论 Bcl-2结合抗凋亡基因可能可作为多种癌症的潜在诊断和预后评估标志物,并可能会为患者术后个体化治疗提供理论支持。
目的探讨FASTKD4在骨肉瘤组织中表达及其对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法通过免疫组化和qPCR的方法检测FASTKD4在骨肉瘤及癌旁组织中的表达情况,同时还通过qPCR检测FASTKD4在不同骨肉瘤细胞中的表达情况,根据结果选择Saos-2细胞作为研究对象,细胞转染FASTKD4小干扰RNA(shFASTKD4组)及对照阴性序列(shCtrl组)。qPCR和Western blot检测转染后细胞中FASTKD4 mRNA和蛋白表达水平。高内涵筛选和CCK-8检测细胞增殖,基质胶成球实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果免疫组化和qPCR结果显示FASTKD4在骨肉瘤组织中表达水平高于癌旁组织(P<0.05),与shCtrl组比较,shFASTKD4组骨肉瘤增殖能力受到抑制(P<0.05),且shFASTKD4组骨肿瘤细胞形成的克隆球直径小于shCtrl组(P<0.05)。shFASTKD4组骨肿瘤细胞凋亡率高于shCtrl组(P<0.05)。结论 FASTKD4在骨肉瘤组织中高表达,沉默FASTKD4可以抑制骨肉瘤细胞增殖和克隆能力,并促进...目的探究白藜芦醇促进子宫内膜癌Ishikawa细胞自噬的作用机制。方法 Ishikawa细胞分为对照组、白藜芦醇组和白藜芦醇+PI3K激动剂(740Y-P)组。用qRT-PCR和Western blot法检测LC3、Beclin1、PI3K和AKT的表达水平,用细胞免疫荧光法检测LC3的表达强度,用电镜观察细胞的自噬情况。结果白藜芦醇可增加细胞的Beclin1和LC3 mRNA(P<0.05,P<0.01)及蛋白水平(均P<0.01);细胞质LC3红色荧光强度增强;自噬小体数量增加。白藜芦醇组Ishikawa细胞P-PI3K(P=0.017)和P-AKT(P=0.025)蛋白水平低于对照组,而白藜芦醇+740Y-P组自噬水平相对于白藜芦醇组有所下降(P<0.01)。结论白藜芦醇可能是通过抑制PI3K/AKT通路诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞自噬,从而抑制细胞增殖。白藜芦醇可能成为子宫内膜癌辅助治疗的新药物。
目的探究miR-193a-5p/HOXA7轴在急性髓细胞白血病(AML)细胞增殖与凋亡过程中的作用。方法收集初治AML患者及健康志愿者的骨髓样本,检测骨髓样本中miR-193a-5p与HOXA7表达水平的变化,分析miR-193a-5p与HOXA7的调控作用。体外培养AML细胞系THP-1,分别给予转染空载体、miR-193a-5p过表达慢病毒载体、HOXA7 shRNA慢病毒载体及同时转染miR-193a-5p和HOXA7过表达慢病毒表达载体,检测不同干预方式下THP-1细胞的增殖与凋亡情况、细胞内miR-193a-5p、HOXA7的表达变化。结果 AML患者骨髓细胞中miR-193a-5p表达低于健康志愿者,而HOXA7表达高于健康志愿者(P<0.01)。荧光素酶活性分析显示miR-193a-5p具有负调控HOXA7的作用。转染miR-193a-5p过表达慢病毒载体的THP-1细胞内的HOXA7表达低于空载体细胞(P<0.01)。与转染空载体细胞比较,转染miR-193a-5p过表达慢病毒载体或转染HOXA7 shRNA慢病毒载体抑制了THP-1细胞增殖,促进细胞凋亡(P<0.05)。同时转染miR-193a-5p和HOXA7过表达慢病毒表达载体的THP-1细胞增殖强于空载体细胞(P<0.05)。结论 miR-193a-5p在AML患者骨髓细胞中表达量显著降低,其可通过抑制HOXA7表达及THP-1细胞增殖来促进THP-1细胞凋亡。 目的研究肾透明细胞癌与癌旁组织的基因表达差异,探讨差异表达基因在肾透明细胞癌发生发展中的作用。方法高通量测序分析肾透明细胞癌组织和癌旁组织的基因差异表达;实时荧光定量PCR及Western blot验证与代谢相关的基因。结果生物信息学显示肾透明细胞癌中有40个ATP合成酶相关基因表达增加,实时荧光定量PCR及Western blot验证了部分二代测序结果,与癌旁组织比较,肾透明细胞癌的ATP5F1 mRNA的相对丰度及蛋白表达增加(P<0.05)。结论肾透明细胞癌可以导致多种基因表达变化,其中ATP合成酶表达增加可能在肾透明细胞癌的发生发展中起到重要作用。目的通过调控食管癌细胞内转录因子SPIB蛋白表达,研究SPIB对食管癌细胞增殖、迁移及侵袭的作用及机制。方法采用Western blot和qRT-PCR方法检测食管癌细胞系中SPIB mRNA和蛋白表达。通过siRNA下调食管癌细胞系KYSE150细胞内SPIB表达,采用CCK-8和流式细胞术检测细胞增殖和细胞周期。建立稳定过表达SPIB的KYSE30细胞系,检测SPIB对细胞增殖和克隆形成能力的影响。采用细胞划痕和Transwell法系统检测SPIB对食管癌细胞迁移和侵袭能力的影响,采用Western blot法检测细胞内N-cadherin和E-cadherin蛋白的表达水平。结果 SPIB在食管癌细胞系中呈高表达,下调其表达可抑制细胞增殖能力和细胞周期进程,并减弱细胞内Cyclin D1蛋白表达。过表达SPIB则促进食管癌细胞增殖和克隆形成。敲低SPIB蛋白表达可减弱食管癌细胞迁移和侵袭能力,并减弱了N-cadherin蛋白的表达。结论 SPIB作为一种促癌因子,可促进食管癌细胞增殖、迁移和侵袭。
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