《生物化工》本文从铁锰矿样品中分离筛选得到一株具有产电能力的细菌,经16S rRNA序列测序鉴定为恶臭假单胞菌,命名为Pseudomonasputida F04,NCBI序列号为MN726711。该菌株在4 g/L蔗糖和中性p H的阳极溶液中,最大面积功率密度达181.8 mW/m2,循环伏安扫描显示该菌体中含有电化学活性物质,为微生物燃料电池处理铁锰废矿提供了科学依据。用蒸馏水浸提蔓三七叶中的粗多糖,利用三氯乙酸法除去多糖中蛋白质,经DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-75凝胶柱分离纯化,分别得到蔓三七叶非淀粉中性多糖和酸性多糖,多糖纯度分别达到91.56%和90.78%。以壳聚糖为碳源,通过水热反应一步制备棕黄色碳点（CDs）溶液。对CDs的光学性能、表面结构和形态进行研究和分析,并通过实验验证了CDs作为Fe3+荧光探针的可行性。研究结果表明:制备所得的CDs平均粒径为8.3 nm,光学性能良好;最佳激发峰波长为350 nm,荧光稳定性良好,荧光量子产率为15.2%;将CDs作为荧光探针检测溶液中Fe3+时,其检出限为0.0216μmol/L,且荧光强度与Fe3+浓度在0～1.0μmol/L呈线性关系。目的:用水热-煅烧两步法,以硝酸钇、硝酸镱和硝酸铒为主要原料,尿素为调节剂,制备了球形Y2O3:Yb,Er纳米粒子。方法:通过条件优化,得到制备Y2O3:Yb,Er纳米粒子的最优条件。结果:优化后的最佳煅烧温度为600℃,比一般文献报道的都要低,显示出此制备方法的优点;所制得的Y2O3:Yb,Er纳米粒子的平均粒径为32.85 nm,且没有细胞毒性。结论:本实验所制备的Y2O3:Yb,Er纳米粒子具有很好的生物相容性,为其在生物学领域的应用提供了可能。通过控制电穿孔时的电压、电脉冲时长、电脉冲次数、质粒浓度和细胞状态等转染条件,将pcDNA3.1(+)-EGFP质粒转入MCF-7细胞,于倒置荧光显微镜下观察EGFP表达情况以检测转染效率,探讨不同电穿孔条件对人乳腺癌MCF-7细胞转染效率的影响,确定MCF-7细胞的最佳电转染条件。结果表明:人乳腺癌细胞MCF-7在电压150 V、质粒浓度1μg/μL左右、脉冲数2次、脉冲时长5 ms、传代时间24 h时可达到较高的电转染率。茯苓是我国一种具有悠久药用历史的传统中药,茯苓多糖具有免疫调节及抗肿瘤等多种药理功能。本实验探究一种新的液体深层培养与静置培养相结合的液体静置发酵法生产茯苓多糖,对最适液体培养时间和静置培养时间进行研究。发现最适静置前液体培养时间为3 d,最适静置培养时间为10 d,胞内多糖含量达到9.8 g/100gCDW,产量达到1.28 g/L,可见液体静置发酵是一种生产茯苓多糖的理想方法。通过热诱导法制备EGCG-β-LG纳米粒,并通过单因素实验考察β-LG浓度、EGCG浓度、pH、热激温度对EGCG-β-LG纳米粒包封率的影响。按照优化后的处方配比制备EGCG-β-LG纳米粒,以保护EGCG生物活性,提高EGCG体外稳定性,并测定其包封率、粒径、Zeta电位、体外稳定性及体外释放率。结果表明p H为6.5、热激温度75℃、β-LG浓度3mg/mL、EGCG浓度0.8mg/mL是制备EGCG-β-LG纳米粒的最佳条件。EGCG-β-LG纳米粒包封率为82.61%、粒径为94.46nm、Zeta电位为-27.9mV。EGCG-β-LG纳米粒的EGCG保留率高于EGCG水溶液,其在pH5.5和pH7.4的体外释放率皆低于EGCG水溶液。制备得到的EGCG-β-LG纳米粒体外稳定性较EGCG水溶液有所提高,并有一定的缓释性能。目的:以小鼠睾丸组织c DNA文库为模板,利用RT-PCR技术成功地克隆出了一个在小鼠睾丸组织中特异性高表达的与生精细胞凋亡相关的新基因LRRC34。方法:经生物信息学分析,该基因定位于小鼠3号染色体的3A和3B之间,并且含有11个外显子,10个内含子。其c DNA全长序列为1 840 bp,开放阅读框为1 248 bp,编码一个含有415个氨基酸残基的蛋白质。结果:多组织RT-PCR结果表明,该基因仅在小鼠睾丸组织中特异性表达,因此推测其可能在睾丸发育和精子形成的过程中起重要作用。结论:本基因的克隆为后续LRRC34基因功能的研究奠定了良好的基础,为男性生殖方面相关疾病提供了一定的理论依据。研究开发一款含溶菌酶的抗敏漱口水泡腾片,添加功效成分溶菌酶和减轻牙本质敏感症状的有效成分氯化锶、硝酸钾,压片制成泡腾片。临床试验显示,试验组牙齿VAS值明显低于对照组;4周及8周后实验组相对于对照组VAS值分别减少了25.61%和62.27%,且具有统计学差异(P <0.05)。该泡腾片具有减轻牙本质敏感症状的临床功效,携带方便,具有推广价值。采用流式Annexin V-FITC/PI双染法检测对照组、DDP(顺铂)处理组、Mdivi-1+DDP处理组三组L1210细胞凋亡情况,用荧光探针DCFH-DA检测各组细胞内ROS水平,探讨Mdivi-1对顺铂诱导L1210细胞活性氧产生及细胞凋亡的影响。结果表明与对照组相比,DDP处理组L1210细胞凋亡数量明显增加,且细胞内ROS水平明显升高;Mdivi-1+DDP处理组细胞凋亡数量及ROS产生较DDP处理组均明显减少。Mdivi-1可抑制顺铂诱导的L1210细胞ROS产生及细胞凋亡。土壤微生物总DNA经试剂盒提取,使用CODEHOP引物进行木聚糖酶基因编码区核心序列进行扩增,根据所扩增序列设计hiTAIL-PCR特异性引物,最终克隆了1个编码区长度为1 284 bp的新颖木聚糖酶基因。生物信息学分析表明,该基因编码蛋白质氨基酸序列长度为427 aa,分子量为47 398.91 Da,理论等电点(pI)为8.99,是一个不含跨膜区域的亲水性蛋白。采用电化学阳极氧化法结合盐酸腐蚀法在316LSS表面构筑双重纳米结构,进一步采用PTES进行修饰,构筑316LSS疏水表面,对其结构和形貌等进行全面的研究和分析。结果表明,316LSS表面成功构筑了双重纳米结构,纳米坑直径为(86±12)nm,纳米小颗粒的直径为(17±4)nm,PTES被成功修饰在316LSS表面,316LSS表面的接触角由76°±3°提高至106°±4°,且其抗菌性能也得到了提高。316LSS的改性制备有望为金属材料表面的进一步改性研究提供实验和理论依据。以呋喃妥因代谢物AHD作为检测目标物,选择SB4型炭黑作为抗体标记物,使用BB缓冲液分散炭黑颗粒,制得胶体碳溶液并优化胶体碳标记抗体条件。选择Millipore135s膜作为载体膜,将包被原和羊抗兔二抗适当分散后分别喷涂在该膜上,干燥后组装试纸条,建立免疫层析分析方法;确定方法检出限,考查试纸条的灵敏度和稳定性并应用于水产品(鱼类)的检测。最优条件下组装试纸条的方法检出限为1.0μg/L,实际样品选择4种常见鱼类检测,向其中添加AHD标准品,样品经过处理后,使用该试纸条进行检测,检出限为0.2μg/kg。目测即可得出结果,无需借助仪器,检测时间不超过15 min。利用β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿苷、得淫羊藿素,通过对温度,pH,缓冲液倍数,底物与酶比,酶解时间5个因素设计单因素实验,并在单因素实验的基础上设计正交实验,优化工艺条件,以提高淫羊藿素的转化率。正交实验结果表明,对转化率影响最大的因素是pH,最小是底物与酶比;最佳工艺条件下(温度50℃、pH为5、酶解时间为20 h、底物与酶比为6∶1)的转化率为95.73%。
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