《中国典型病例大全》 急性心肌梗死是最常见的心血管疾病之一,由于冠状动脉供血不全导致心肌细胞大量坏死、生存微环境恶化,近期可发生心肌细胞机械-电生理功能紊乱,远期可导致心力衰竭.目前的临床治疗方法虽能在一定程度上改善心功能,减轻心室重塑,但由于心肌细胞再生能力有限,心脏功能难以完全恢复正常.近年来,脂肪来源干细胞移植治疗急性心肌梗死受到广泛关注,但由于移植后细胞的存留和存活率普遍较低,总体治疗效果并不理想.本文对目前脂肪来源干细胞治疗急性心肌梗死的现况及提高其疗效的途径和方法作一综述. 造血干细胞(HSCs)是血液系统中的一类成体干细胞群,具有自我更新和多谱系分化两个基本特征.造血干细胞移植(HSCT)可以治疗退行性疾病和多种血液系统疾病.脐带血来源造血干细胞(CB HSCs)是降低HLA配型要求的突破点,但单份脐带血中HSCs数量不能满足使用要求,为了获得足够数量的CB HSCs,体外扩增是一种可行的方法.近几年,学者们探索了多种体外扩增方法,包括优化细胞生长因子混合物、与基质细胞共培养及加入小分子化合物(SMCs)激动剂等.目前应用细胞因子联合小分子的扩增方法在多个临床试验中获得成功.本文对目前体外扩增CB HSCs的研究进展做一综述.类器官是利用干细胞的自我更新和分化能力,在体外培养形成的一种微小组织器官类似物,在很大程度上具有体内相应器官的功能.迄今为止,在3D培养条件下,已经成功培养出多种类器官如肺、胃、肠、肝和肾等类器官.它们不仅可作为组织器官的替代品用于药物和临床研究,还可用于体内器官移植.本文综述了类器官在药物毒性检测、药效评价和新药筛选中的作用以及利用类器官建立疾病模型、研究组织器官发育和类器官在精准医疗、再生医学中的价值.冠状动脉或其分支阻塞而引起心肌缺血可导致急性心肌梗死,梗死区域周围形成瘢痕组织后心脏收缩功能下降,心室发生病理性重塑,最终出现充血性心力衰竭.心肌球源性细胞(CDC)是来自心肌的干细胞,在体外可以分化为心肌细胞和血管内皮细胞.在体内可以触发自身心肌细胞增殖和通过旁分泌募集祖细胞.旁分泌介质不但拥有干细胞的作用,且没有细胞移植相关的并发症.临床实验证明了CDC可以促进心肌梗死后的心脏功能的恢复.长期疗效还有待大规模临床试验的验证.CD73又称5'-核苷酸酶,普遍存在人体多种细胞,是通过糖基-磷酰肌醇介导连接在胞膜上的糖蛋白.CD73有水解酶活性,可降解5'-磷酸腺苷成腺苷,进而通过腺苷与各种腺苷受体亚型作用发挥血管生成、旁分泌和免疫抑制等作用;此外CD73可发挥非酶作用,介导细胞间结合和信号传递.CD73与肿瘤、心肌损伤、脑损伤、糖尿病、弓形虫入侵、系统性红斑狼疮和器官移植等多种临床疾病相关,影响疾病的发生发展,CD73及其水解产生的腺苷与腺苷受体作用,影响机体的生理和病理过程.本文综述近年来CD73的基础和临床研究,以明晰CD73基础研究和临床应用的联系,加快CD73的临床应用.目的 探讨血小板反应蛋白1(TSP1)对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤及炎症因子分泌的影响.方法 以肾小管上皮细胞为研究对象,通过转染TSP-1 shRNA(shTSP-1),沉默TSP-1基因,探讨下调TSP1对高糖条件下肾小管上皮细胞损伤的影响.肾小管上皮细胞依次分为:对照组(以5.6 mmol/L葡萄糖培养)、高糖组(以30 mmol/L葡萄糖培养)、NC+高糖组(对照慢病毒转染,以30 mmol/L葡萄糖培养)、干扰+高糖组(TSP1 shRNA慢病毒转染以30 mmol/L葡萄糖培养).Realtime PCR和Western Blot检测高糖对细胞中TSP1表达影响,同时检测TSP1 shRNA干扰效果.DCFH-DA法检测细胞中活性氧(ROS)水平,硫代巴比妥酸法检测培养液中丙二醛(MDA)含量,ELISA法检测培养液上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)含量,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Western Blot法检测细胞中活化的Caspase-3(c-caspase-3)蛋白水平.两组均数差异比较采用独立样本t检验,多组均数间差异比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验.结果 高糖组细胞中TSP1 mRNA和蛋白水平高于对照组(P<0.05).干扰+高糖组细胞中TSP1 mRNA和蛋白水平低于高糖组(P<0.05).与对照组比较,高糖组细胞中ROS水平升高,培养液中MDA、TNF-α、IL-8含量升高[(2.36±0.21)nmol/ml、(45.91±2.87)ng/ml、(25.42±3.26)ng/ml:(1.05±0.13)nmol/ml、(20.14±1.36)ng/ml、(12.98±1.63)ng/ml],差异有统计学意义(F=18.595,F=43.825,F=21.155,P<0.05);细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞中c-caspase-3蛋白水平升高(P<0.05).与高糖组和NC+高糖组比较,干扰+高糖组细胞中ROS水平降低,培养液中MDA、TNF-α、IL-8含量降低[(1.63±0.10)nmol/ml、(34.20±2.06)ng/ml、(18.75±1.62)ng/ml:(2.36±0.21)nmol/ml、(45.91±2.87)ng/ml、(25.42±3.26)ng/ml和(2.30±0.42)nmol/ml、(46.32±5.24)ng/ml、(26.91±2.74)ng/ml],差异具有统计学意义(F=18.595,F=43.825,F=21.155,P<0.05);细胞凋亡率降低,细胞中c-caspase-3蛋白水平降低(P<0.05).结论 高糖诱导肾小管上皮细胞中TSP1表达,下调其表达可以减少细胞分泌炎症因子,抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤.
目的 探讨体育运动对冠心病(CHD)患者内皮祖细胞(EPCs)内皮损伤修复能力的影响及其可能的机制.方法 选取广州中山大学第一附属医院收治的68例符合冠心病临床诊断标准的受试者作为研究对象,随机分为对照组和实验组.实验组和对照组均进行常规药物治疗,同时实验组参与3个月踏车运动试验(每周3次,30 min/次,MET为4.5),对照组不进行运动干预.通过Boyden改良小室法和观察荧光标记的EPCs(CM-DiI-EPCs)黏附到内皮细胞单层数量来分别检测EPCs的迁移能力和黏附能力;利用裸鼠颈动脉内皮损伤模型,肱动脉血流介导的血管舒张功能(FMD)和肱-踝动脉脉搏波传导速度(PWV),分别研究EPCs在体内皮损伤修复能力、血管内皮功能和动脉硬度.统计学采用单因素方差和Pearson法相关性分析.结果 3个月的体育锻炼后,实验组受试者外周血EPCs体外的迁移(运动后:52.5±8.9;运动前:30.6±5.4;t=3.767,P=0.013)、黏附能力明显提高(运动后:48.2±7.6;运动前:30.5±4.8;t=4.311,P<0.001),移植后裸鼠颈动脉内皮损伤在体的内皮化面积增大(运动后:55.2﹪±9.1﹪;运动前:35.9﹪±4.9﹪;t=5.315,P=0.012);内皮功能FMD改善(运动前:5.9﹪±2.1﹪;运动后:8.1﹪±2.6﹪;t=3.253,P<0.001);动脉弹性PWV下降[运动前:(1618±160.2)cm/s;运动后:(1456±125)cm/s;t=2.781,P=0.014];Pearson相关分析结果显示,升高的FMD、下降的PWV分别与增加的EPCs再内皮化面积呈正相关,而对照组以上指标无明显改变.结论 体育运动明显改善冠心病患者血管内皮功能,提高动脉弹性,部分机制可能与循环EPCs介导的内皮损伤修复能力增强相关.目的 探讨青光安颗粒剂抑制转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人类Tenon成纤维细胞(HTFs)增殖的可能机制.方法 从接受青光眼滤过手术(GFS)的个体获得人结膜下Tenon胶囊样品.实验设计分为3组:对照组(HTFs未经处理,n=10);TGF-β1诱导组(100 ng/ml TGF-β1诱导HTFs,构建GFS术后细胞模型,n=10);TGF-β1+青光安治疗组(TGF-β1诱导+青光安颗粒剂血清处理HTFs,n=30).TGF-β1+青光安治疗组按照青光安血清的剂量进一步分为3组:TGF-β1+青光安高剂量组(TGF-β1诱导+青光安颗粒剂血清5 ml处理HTFs);TGF-β1+青光安中剂量组(TGF-β1诱导+青光安颗粒剂血清2.5 ml处理HTFs);TGF-β1+青光安低剂量组(TGF-β1诱导+青光安颗粒剂血清处理1 ml HTFs);每组设10个培养皿.通过CCK-8检测青光安对TGF-β1诱导HTFs增殖的影响;通过流式细胞术评估青光安对细胞周期的影响;通过Cyto-ID免疫细胞化学染色测定青光安颗粒剂对HTFs细胞自噬的影响;采用RT-PCR和Western Blot法测定自噬体形成的必需蛋白质Beclin-1,ATG-5和LC3-Ⅲ基因和蛋白的表达水平.多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验.结果 青光安能够抑制TGF-β1诱导HTFs的增殖能力,TGF-β1+青光安高剂量组细胞增殖水平(13.52±1.24)较TGF-β1诱导组(23.42±1.25)降低,差异有统计学意义(F=12.347,P<0.01);TGF-β1诱导G0/G1期的比例(88.29±0.35)降低,而S期的比例(9.04±0.25)升高,而青光安治疗能够导致G0/G1期的比例(91.18±1.04)增加,而S期的比例(5.41±0.59)降低,差异有统计学意义(F=13.857,P<0.01);与TGF-β1诱导组相比,用TGF-β1+青光安治疗组导致荧光染色强度(1.84±0.14)降低,HTFs阳性细胞数目(112.46±12.11)减少,差异有统计学意义(F=12.347,P=18.472);TGF-β1+青光安治疗组能抑制TGF-β1诱导对自噬基因Beclin-1、ATG-5和LC-3ⅢmRNA和蛋白质表达增加(P<0.05).结论 青光安颗粒剂抑制TGF-β1诱导的HTFs增殖,且可能机制为青光安诱导HTFs细胞周期停滞于G0/G1期,而且青光安可减少TGF-β1诱导的HTFs自噬.
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